南京林业大学学报(自然科学版)

作者：王玉宸,王欣玉,彭龙,袁志林

单位：1.林木遗传育种国家重点实验室,中国林业科学研究院,北京 100091,2.南京林业大学林学院,江苏 南京 210037,3.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江 杭州 311400

关键词：担子菌,原生质体,同核体,杂合度,斜盖伞属

基金：国家自然科学基金青年基金项目(31901290),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(CAFYBB2020QB002)

【目的】笔者前期从栎树外生菌根根尖组织中分离得1株真菌:荷伯生氏斜盖伞(Clitopilus hobsonii),发现其对苗木具有促生效应。研究旨在获得该菌的同核体菌株,为荷伯生氏斜盖伞高质量基因组数据的获得及其对植物的促生作用机制研究奠定基础。【方法】通过原生质体再生技术得到候选菌株,基于候选菌株与出发菌株的生长性状及菌落形态特征比较、RNA聚合酶Ⅱ基因(RNA polymerase Ⅱ gene,rpb2)和翻译延伸因子基因(translation elongation factor 1-α gene,tef)两个单拷贝保守基因片段的杂合性分析,以及DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)细胞核荧光染色观察,确定获得的再生菌株为同核体。【结果】经分离培养发现:其中一类再生菌株与出发菌株的菌落形态特性相比差异明显,且该再生菌株生长速度较慢;镜检结果表明,再生菌株与出发菌株均不存在锁状联合结构;DAPI细胞核荧光染色结果表明出发菌株菌丝细胞中均含有两个细胞核,而再生菌株初生菌丝中可观察到仅含1个细胞核的细胞结构,后期则发生双核化;rpb2和tef片段序列比对结果进一步表明出发菌株存在多个杂合位点,而在再生菌株中则未发现。【结论】本研究制备的再生菌株为荷伯生氏斜盖伞同核体菌株,具有单一、稳定的遗传信息,可为异核体真菌基因组数据的获得提供材料基础。

来源：2022年第5期

《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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