南京林业大学学报(自然科学版)

作者：金梦双,罗艺,徐进

单位：林木遗传育种全国重点实验室, 南方现代林业协同创新中心, 南京林业大学林草学院,水土保持学院, 江苏 南京 210037

关键词：柳杉,未成熟胚,胚性愈伤组织,诱导与增殖

基金：国家重点研发计划(2023YFD2200105)

【目的】 系统探索并优化柳杉(Cryptomeria fortunei)体细胞胚胎发生过程中胚性愈伤组织的诱导与增殖条件,建立柳杉的体细胞胚胎发生技术平台。【方法】以柳杉未成熟种子为外植体,分析采集时间,基本培养基类型、碳源种类及含量、植物生长调节剂(plant growth regulator, PGR)种类、配比及浓度等因素对其胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。【结果】①通过对基本培养基(MS、1/2 MS、DCR、1/2 DCR、WPM和MLV)的筛选,发现DCR培养基的胚性愈伤组织诱导率最高,达56.00%,为最佳培养基;②不同植物生长调节剂对胚性愈伤组织的诱导差异显著,其中附加2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L KT的DCR培养基诱导率最高,达58.00%;③不同碳源对胚性愈伤诱导效率也有显著影响,其中30 g/L蔗糖的诱导率最佳(40.67%);④在愈伤组织继代培养时,活性炭与蔗糖添加量,PGR浓度及配比对胚性愈伤的增殖均有显著影响。DCR培养基添加0.50 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+2.0 g/L活性炭和30 g/L蔗糖,可获得最佳增殖效果,增殖系数可达615.44,且未出现褐化。【结论】合子胚的成熟度、基本培养基类型、碳源种类及添加量、植物生长调节剂(PGR)浓度及配比,以及活性炭添加量对柳杉胚性愈伤组织诱导和增殖均有显著影响。本研究通过优化柳杉胚性愈伤组织的诱导与增殖的培养条件,建立稳定的柳杉体细胞发生胚性愈伤组织培养体系,为我国柳杉的优良种质资源快速繁殖及遗传转化提供技术支撑。

来源：2026年第1期

《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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