南京林业大学学报(自然科学版)

作者：李峰卿,陈金慧,施季森

单位：<sup class=\mag-xml-aff-label-sup added-by-sys\>1</sup> 中国林业科学研究院亚热带林业实验中心, 江西 分宜 336600,<sup class=\mag-xml-aff-label-sup added-by-sys\>2</sup> 林木遗传育种全国重点实验室, 南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林草学院, 江苏 南京 210037

关键词：湿地松&#x000D7;加勒比松杂交种,胚性愈伤组织,体细胞胚,植株再生

基金：国家重点研发计划(2023YFD2200903),中央财政林业科技推广示范项目(JXTG[2025]01)

【目的】 对湿地松&#x000D7;加勒比松(Pinus elliottii &#x000D7; P. caribaea)杂交种体细胞胚胎发生的影响因子进行研究,探究不同发育阶段各因子在体细胞胚发生过程中的作用,为建立高效的体细胞胚发生体系,并规模化生产应用提供技术支撑。【方法】以4个杂交组合的湿地松&#x000D7;加勒比松杂交种未成熟合子胚为材料,分析影响胚性愈伤组织诱导的主要因素:基因型、合子胚发育阶段、基本培养基、激素种类和浓度等,筛选生长状态良好的胚性愈伤组织,进行体细胞胚成熟、萌发及植株再生研究,最终获得再生植株。【结果】基因型、合子胚发育阶段、基本培养基和激素组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有显著影响。6月9—23日即裂生多胚至子叶前期阶段为外植体的最佳采集时期,最佳的胚性愈伤组织诱导培养基为DCR+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L BA+0.5 mg/L KT,平均诱导率为19.51%;最佳胚性愈伤组织继代与增殖培养基为改良P6+0.8 m/L 2,4-D+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L KT;体细胞胚成熟最佳培养基为改良P6+10.0 mg/L ABA+10.0 mg/L GA+0.2 mg/L 2,4-D+4 000 mg/L 肌醇+2.0 g/L活性炭,成熟培养周期为6~7 周,每mL 密实细胞体积(packed cell volume,PCV)胚性愈伤组织可诱导产生298个成熟体细胞胚;干化处理抑制了体细胞胚的萌发,最佳萌发培养基为1/2 DCR+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L BA+2.0 g/L 活性炭;再将正常萌发的体细胞胚在1/2 DCR +0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L BA+2.5 g/L 活性炭培养基上转接培养至长出真叶,苗高3~4 cm时,即可移栽至河沙、珍珠岩、泥炭土体积比为1∶1∶1的基质中,1月后可生长成7~8 cm健壮植株。【结论】通过改进和优化,提出一种更高效的固-液-固交替培养方法,建立完整、高效的湿地松&#x000D7;加勒比松杂交种体细胞胚发生体系,为杂交种的大规模繁殖提供了基础平台,在造林、遗传保护和基于生物反应器的繁殖系统中具有较高应用价值。

来源：2026年第1期

《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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